這是一份詳細(xì)、專業(yè)的 Mini Trans-Blot® 小型轉(zhuǎn)印槽技術(shù)參數(shù)及使用說明書。本說明書綜合了通用操作流程、關(guān)鍵參數(shù)和注意事項(xiàng)，適用于這類標(biāo)準(zhǔn)垂直槽式濕轉(zhuǎn)印系統(tǒng)。

一、伯樂Mini Trans-Blot® 小型轉(zhuǎn)印槽產(chǎn)品概述

Mini Trans-Blot® 小型轉(zhuǎn)印槽是一種用于 Western Blot（蛋白質(zhì)免疫印跡）實(shí)驗(yàn)的垂直槽式濕法轉(zhuǎn)印裝置。其核心功能是在電場作用下，將經(jīng)過SDS-PAGE凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)，從凝膠上原位、定向地轉(zhuǎn)印到固相支持膜（如PVDF膜或硝酸纖維素膜）上，以進(jìn)行后續(xù)的免疫檢測。

二、伯樂Mini Trans-Blot® 小型轉(zhuǎn)印槽技術(shù)參數(shù)

凝膠容量：2塊

凝膠尺寸：10 x 7.5

推薦電源：PowerPacBasic或PowerPac Hc

應(yīng)用：Western雜交、核酸轉(zhuǎn)印

尺寸：12 x 16 x 18 cm

重量：0.75 kg

緩沖液：450 ml

效率：1小時(shí)內(nèi)轉(zhuǎn)印2塊10x7.5cm凝膠

轉(zhuǎn)印凝膠夾：2個(gè)可夾10 x 7.5 cm 凝膠

高質(zhì)量：轉(zhuǎn)印小型凝膠

型號(hào)：1703935、1703930

三、系統(tǒng)組件清單

1、轉(zhuǎn)印槽主體：帶電極和蓋子的透明槽體。

2、凝膠夾板（“三明治"夾）：一對黑色和透明的塑料夾板，用于固定轉(zhuǎn)印“三明治"。

3、海綿墊：至少兩塊，用于提供均勻壓力和支持。

4、濾紙墊片：至少兩張，尺寸略大于凝膠和膜。

5、冰盒（冷卻芯）（可選配件）：插入槽內(nèi)，用于在轉(zhuǎn)印時(shí)降溫。

6、電源導(dǎo)線：紅色（正極，陽極）和黑色（負(fù)極，陰極）。

四、操作步驟（濕轉(zhuǎn)印法）

A、轉(zhuǎn)印前準(zhǔn)備

1、配制緩沖液：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求配制足夠的轉(zhuǎn)印緩沖液（如Tris-甘氨酸緩沖液、Towbin緩沖液等），并預(yù)冷至4°C。

2、制備膜和濾紙：將PVDF膜在甲醇中浸泡15秒活化，然后與濾紙、海綿墊一同放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡至少15分鐘。

3、制備凝膠：電泳結(jié)束后，小心撬開玻璃板，切去濃縮膠和多余部分，將目的蛋白所在的分離膠放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。

B、組裝“三明治"

關(guān)鍵原則：始終在盛有緩沖液的托盤中進(jìn)行，防止夾入氣泡。

1、將凝膠夾板的透明面（陰極側(cè)，對應(yīng)負(fù)極）向下打開。

2、依次在夾板上放置：

海綿墊

濾紙

凝膠（正面朝下）

膜（精確對齊覆蓋凝膠，避免移動(dòng)）

濾紙

海綿墊

3、小心地合上黑色夾板（陽極側(cè)，對應(yīng)正極），確保各層對齊、無氣泡。聽到“咔噠"聲表示夾緊。

4、將組裝好的凝膠夾板插入轉(zhuǎn)印槽的卡槽中，確保黑色夾板面對紅色正極（陽極），透明夾板面對黑色負(fù)極（陰極）。即：凝膠在負(fù)極側(cè)，膜在正極側(cè)（蛋白質(zhì)帶負(fù)電，向正極移動(dòng)）。

C、進(jìn)行轉(zhuǎn)印

1、將轉(zhuǎn)印槽置于冰水浴中，或連接好外接循環(huán)冷卻水系統(tǒng)。

2、向槽內(nèi)灌滿預(yù)冷的轉(zhuǎn)印緩沖液，確保浸沒凝膠夾板。

3、蓋上槽蓋，連接電源：紅線接紅端（陽極），黑線接黑端（陰極）。

4、設(shè)置電源參數(shù)：

恒壓法（常用）：設(shè)定 100V，轉(zhuǎn)印60-90分鐘（分子量標(biāo)準(zhǔn)）。

恒流法：設(shè)定 250-300 mA，轉(zhuǎn)印60-90分鐘。

高分子量蛋白：可采用 30V 恒壓過夜轉(zhuǎn)印。

5、啟動(dòng)電源，開始轉(zhuǎn)印。過程中會(huì)產(chǎn)生熱量，必須確保有效的冷卻。

D、轉(zhuǎn)印后處理

1、轉(zhuǎn)印結(jié)束后，關(guān)閉電源，斷開導(dǎo)線。

2、取出凝膠夾板，拆開，用鑷子小心取出膜。

3、用麗春紅S染液或立春紅染膜液快速染色，檢查轉(zhuǎn)印效率。也可直接進(jìn)行后續(xù)的封閉和免疫雜交步驟。

五、維護(hù)與保養(yǎng)

1、每次使用后，用去離子水清洗所有部件（槽體、夾板、海綿、冰盒等），晾干后保存。

2、避免刮擦電極（鉑金絲），切勿用硬物接觸。

3、定期檢查電極是否腐蝕或斷裂。

4、海綿和濾紙為消耗品，多次使用后若變形或破損應(yīng)及時(shí)更換，以保證壓力均勻。

5、長期不用時(shí)，將所有部件干燥存放于清潔處。